SmArtfect 质粒转染试剂
产品信息
产品货号 | 产品名称 | 规格 | 价格(元) |
DY20016 | SmArtfect 质粒转染试剂 | 0.5 mL | 600 |
DY20016 | SmArtfect 质粒转染试剂 | 1 mL | 1138 |
DY20016 | SmArtfect 质粒转染试剂 | 1.5 mL | 1750 |
产品描述
SmArtfect是专门用于质粒转染的新一代阳离子聚合物转染试剂。与其他转染试剂相比,具有转染效率高、细胞毒性低、稳定性好、重复性优等特点。由于其不易被血清清除,该转染试剂转染时无需更换培养基,使得核酸转染的操作简便易行、高效快捷。
保存方式
4℃保存,有效期2年。
操作说明(仅供参考)
参考如下步骤,向24孔培养板中细胞转染质粒DNA。
1. 转染前一天,胰酶消化细胞并计数4x105,细胞铺板,使其在转染日密度为90%。细胞可铺板在500ul含血清,含抗生素的正常生长的培养基中。
2. 对于每孔细胞,使用50ul OPTI-MEM I 稀释500ng质粒DNA。
3. 对于每孔细胞,使用50ul OPTI-MEM I 稀释1ul SmArtfect转染试剂。
4. 混合稀释的质粒DNA和稀释的SmArtfect转染试剂,室温保持20min。溶液可能会混浊,但不会影响转染。
5. 在37℃,5%的CO2培养箱中孵育24-72h。
不同细胞培养介质的转染量表
细胞培养介质 | 100 mm | 60 mm | 35 mm | 6-well | 12-well | 24-well | 48-well | 96-well |
每孔表面积 | 60 cm2 | 20 cm2 | 10 cm2 | 10 cm2 | 4 cm2 | 2 cm2 | 0.8 cm2 | 0.3 cm2 |
培养基体积 | 10 mL | 5 mL | 2 mL | 2 mL | 1 mL | 500 μL | 200 μL | 100 μL |
OPTI-MEM I 使用体积 | 1 mL | 500 μL | 200 μL | 200 μL | 100 μL | 50 μL | 20 μL | 10 μL |
转染试剂体积 | 20 μL | 10 μL | 4 μL | 4 μL | 2 μL | 1 μL | 0.4 μL | 0.2 μL |
DNA质量 | 10 μg | 5 μg | 2 μg | 2 μg | 1 μg | 500 ng | 200 ng | 100 ng |
注意事项
1. 为提高转染效率,建议悬浮细胞在无血清培养体系中驯化几天后进行转染操作。
2. 转染前细胞必须处于良好的生长状态。
3. 转染过程中推荐使用高质量的质粒,如不含内毒素的质粒。
4. 转染前无须用不含血清细胞培养液替换。
5. 转染6h后无须去掉复合物或更换培养基。在细胞中加入复合物24-72h后,分析细胞提取物或进行原位细胞染色等,检测目的基因活性, 这依赖于细胞类型和启动子活性。对于稳定表达,在开始转染24h后将细胞传代至新培养基中,两天后加入筛选抗生素。进行稳定表达需要数天或数周。
6. 为了获得最高的转染效率和最低的细胞毒性,需要优化转染条件,比如细胞密度,质粒的质量,SmArtfect的用量。
7. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
8. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。