金担子素A （AbA，1 mg/mL）
Aureobasidin A (AbA，1 mg/mL)
产品信息
| 产品货号 | 产品名称 | 规格 | 价格（元） |
| DY50213 | 金担子素 A（AbA，1 mg/mL） | 1 mg | 715 |
| DY50213 | 金担子素 A（AbA，1 mg/mL） | 5×1 mg | 2760 |
| DY50213 | 金担子素 A（AbA，1 mg/mL） | 10×1 mg | 4806 |
产品描述
金担子素 A（Aureobasidin A，AbA）是从丝状真菌 Aureobasidium pullulans No.R106 中分离出来的环酯肽类抗生素，具有很强的抗真菌能力。AbA 作用机制是抑制酵母中 AUR1 基因编码的肌醇磷酰胺（inositol phosphorylceramide，IPC）合成酶的活性，干扰鞘脂合成，从而杀死菌株。AbA 在较低的浓度下（0.1-0.5 μg/mL）即可对酵母产生毒性。编码 IPC 合成酶的基因研究较多的来自酿酒酵母菌的 AUR1 基因，以及构巢曲霉的 AURA 基因，两者具有同源性。
AbA非常适合用作阳性克隆子筛选用的药物选择性标记。AbA抗性也是酵母单/双杂交研究中理想的报告子。本品为溶于甲醇的AbA溶液，浓度为1 mg/mL。具体的工作浓度取决于宿主细胞的敏感度。
保存方式
2-8℃保存，有效期为2年。
产品性质
CAS： 127785-64-2
分子式（Formula）：C60H92N8O11
分子量（Molecular weight）：1100
纯度（Purity）：≥95%
操作说明（抗 AbA 的酵母转化系统）
1. 加入 0.5 mL 过夜培养的酵母到 50 mL YPD 培养基中。
2. 30℃培养约 6 小时，测定 OD660 为 1～2。使用二倍体时，测定 OD660为 2～4。
3. 1,000×g 离心 5 分钟。
4. 用 10 mL溶液A（配方：100 mM Lithium acetate，10 mM Tris-HCl pH 7.5，1 mM EDTA）悬浮沉淀，1,000×g 离心 5分钟。
5. 用溶液 A 重悬沉淀，直到 OD660为 150。
6. 从管内取 100 µL细胞悬浮液，30℃培养 1 小时。
7. 加入5 µg载体（环状或线性 DNA）和150 µg Carrier DNA（已经过 100℃加热 10 分钟，并迅速冷却）。
注：pAUR101 需使用线性 DNA 进行转化。使用环状 DNA 会降低转化效率甚至转化不成功。pAUR112 和 pAUR123 需使用完整的质粒 DNA 进行转化。
8. 加入 850 µL 溶液 B（配方：取 40 g Polyethylene Glycol 4000 溶于 100 mL溶液 A 充分溶解，需要现用现配），轻轻混匀。
9. 30℃培养 30 分钟后，42℃培养 15 分钟。
10. 室温放置 10 分钟。
11. 5000 rpm 离心 1 分钟，用 5 mL YPD 培养基悬浮沉淀。
12. 30℃培养 6 小时。
13. 5000~10000 rpm 离心，用 1-10 mL 0.9% NaCl 悬浮沉淀。
14. 在 YPD 选择培养基平板（含一定浓度的AbA，依菌株类型而定）上接种 100 µL 细胞悬液。30℃培养 3-4 天后转化完成。
15. 挑取阳性转化子，可测定转化效率（以每微克质粒 DNA 转化的菌落数来表示）。
不同菌株建议 AbA 的工作浓度
菌属 | 菌种 | MIC（µg/mL） |
S.cerevisiae | ATCC9763（diploid） | 0.2-0.4 |
Baker’s yeast（diploid） | 0.2-0.4 | |
Beer yeast（triploid or tetraploid） | 0.1 | |
SH3328（haploid） | 0.1 | |
Shochu yeast（diploid） | 0.1 | |
Sake yeast（diploid） | 0.1-0.2 | |
C.albicans | TIMM-0136（diploid） | 0.04 |
C.tropicalis | TIMM-0324（diploid） | 0.08 |
Schizo.pombe | JY-745（monoploid） | 0.1 |
售前咨询专员