5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-吡喃半乳糖苷

5-Bromo-4-Cloro-indolyl-β-D-galactopyranoside（X-α-Gal）

产品信息

产品描述 

X-α-Gal是酵母半乳糖苷酶（MEL1）的显色底物，MEL1是GAL4酵母双杂交系统的一个报告基因，该基因受GAL4调控。MEL1编码的分泌型的α-半乳糖苷酶可水解无色的X-α-Gal，形成蓝色产物。MEL1基因激活后，X-α-Gal检测阳性克隆表达的α-半乳糖苷酶，阳性克隆直接在含有X-α-Gal的固体培养基上呈蓝色。因此无需裂解细胞，费时费力地检测 β-半乳糖苷酶报告基因，只需通过蓝白颜色筛选，即可快速和简便地识别阳性克隆。X-Gal与X-α-Gal不同，X-Gal是E.coli β-半乳糖苷酶 （LacZ） 的反应底物，而X-α-Gal是酵母 α-半乳糖苷酶（MEL1）的反应底物。X-α-Gal用作酵母双杂交系统中蓝白筛选的筛选标记。

携带MEL1基因的酵母菌株：Y2HGold、Y190、AH190、Y187、PG69-2A

产品参数

别名：5-溴-4-氯-3-吲哚-a-D-吡喃半乳糖苷

CAS：107021-38-5

分子式：C₁₄ H₁₅BrClNO₆

分子量：408.63

外观（性状）：白色粉末

纯度：95%

保存方式

-20 ℃避光保存，有效期 2年

操作说明（仅供参考）

一、涂布于预制平板：

1）溶解24 mg X-α-Gal于6 mL DMF，终浓度为4 mg/mL，

2）涂布200 μL (15 cm) 或者100 μL (10 cm) X-α-Gal 储存液于预制平板上，

3）置于37℃培养箱至液体被吸收（最长可放4小时），

4） 将转化细菌或酵母涂于平板上，于37℃或30℃培养直至蓝色菌落出现。

二、直接加入琼脂中：

1）溶解60 mg X-α-Gal于3 mL DMF，终浓度为20 mg/mL，

2）将已灭菌琼脂培养基冷却至50-55℃，

3）向上述培养基中加入20 mg/mL X-α-Gal，比例为每升培养基中加入1 mL X-α-Gal溶液。

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