即用型无蛋白快速封闭液
Ready-to-use Without Protein Fast Blocking Solution
产品信息
产品货号 | 产品名称 | 规格 | 价格(元) |
DY90102 | 即用型无蛋白快速封闭液 | 100ml / 5×100ml | 135/558 |
产品描述
本品是一种即用型、高效快速的蛋白印迹实验(Western blotting)封闭液。封闭时间仅需10分钟,效果优于脱脂奶粉、BSA、酪蛋白等传统封闭液。使用本品封闭可阻止抗体检测期间的非特异性结合,但允许进行特异性检测。与传统封闭液相比,有更高的信号,更低的背景值,信噪比更高。该试剂不含有哺乳动物来源的蛋白成分,避免与抗体发生交叉反应。该缓冲液可与磷酸化的抗体以及 NC 膜和 PVDF 膜兼容。
保存方式
4℃短期保存;-20℃保存,有效期1年。
操作说明(仅供参考)
1. 完成转膜后,将膜移入到平皿或者其他适合的容器中(可以不洗涤膜)。
2. 根据膜的大小,加入适量体积的无蛋白快速封闭液,确保完全浸没覆盖膜,对于7.5×8 cm的膜推荐使用量5-10mL。
3. 置于水平摇床上,室温条件下振荡孵育10分钟。
4. 取出封闭完成的膜,用洗涤液冲洗膜2-3次,每次5分钟, 之后即可进行一抗孵育等Western blot 实验。
注意事项
1. 通常用于PVDF膜或NC膜的封闭时间为10分钟。对于背景低的抗体,可以缩短到5分钟,而对于一些背景非常高的抗体,可以尝试将封闭时间延长为30-60分钟。
2. 由于没有任何一种封闭液是适用于所有实验体系的,因此对于一些特殊的实验或抗体,可能需要根据具体情况考虑使用其它更合适的封闭液,比如奶粉、BSA等封闭试剂。
3. 信号弱或者无信号:有可能是上样量不足;转膜效率低;抗体效价低,特异性差等原因造成,需要根据实验情况优化实验条件。
4. 背景高:有可能是抗体使用量过多;蛋白膜洗涤时间不足;抗体和封闭液发生交叉反应;试剂或仪器设备被污染等原因造成,需要根据实验具体情况进行调整。