DAPI

产品信息

产品描述

DAPI是一种可与DNA的小沟结合的细胞渗透性荧光探针，它可与双链DNA 结合，发出蓝色荧光，荧光强度是自身的20倍。琼脂糖凝胶电泳DNA的染色中DAPI的染色效果是溴化乙淀的数倍。DAPI也能对RNA染色，染色机理是其可以选择性嵌入“AU序列”并发出荧光。

DAPI常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。 尽管DAPI不能通过活细胞膜，但却能穿透扰乱的细胞膜而对核染色。DAPI具有很高的光漂白承受水平，能用来检测酵母线粒体DNA，叶绿体DNA，病毒DNA， 支原体DNA以及染色体DNA。

DAPI-DNA复合物的最大激发光为364nm，最大发射光为454nm。DAPI水溶液在349nm处和263nm处有吸收峰。它可以与荧光素二乙酸酯结合使用，用于成熟花粉粒细胞核的活体染色。

保存方式

2-8℃干燥避光保存。

产品性质

别名：2-(4-Amidinophenyl)-6-indolecarbamidine dihydrochloride, DAPI dihydrochloride，DAPI染色液，4’,6-联脒-2-苯基吲哚二盐酸盐

性状：黄色粉末

CAS：28718-90-3

分子式：C16H15N5•2HCl 

分子量：350.25

纯度：≥98% (HPLC)

溶解性：微溶于水，加热或超声波助于溶解。

操作说明（仅供参考）

1. 配制方法：用1mL ddH2O将DAPI溶解，制得2.9mM的DAPI溶液(1mg DAPI/1mL H2O)。取适量DAPI水溶液加到PBS或双蒸水中，制备成10～50µM 的DAPI工作液。

注：DAPI不能直接用PBS等缓冲溶液溶解，需要先用水将其溶解。

2. 使用浓度：0.5-10 μg/mL

3. 使用方法：

A：固定的细胞或组织染色：

1) 对于固定的细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。DAPI染色通常在其他染色的最后进行。如果不需要进行其它染色，则直接进行DAPI 染色。

2) 对于贴壁细胞或组织切片：加入适量DAPI染色液，覆盖住样品即可。

3) 对于悬浮细胞：至少加入待测染色样品体积3倍的染色液，混匀。室温放置3-5 分钟。

4) 吸除DAPI染色液，用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次，每次3-5分钟。

5) 用带有360nm激发波长，460nm发射波长的滤光片的荧光显微镜观察细胞。

B：活细胞或组织染色：

1) 细胞培养物中加入适量DAPI染色液，约1/10细胞培养基体积，必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于6孔板一个孔需加入1 mL染色液，对于96孔板一个孔需加入100 μL染色液。

2) 在 37℃培养细胞 10～20 分钟。

3) 用 PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。

4) 用带有360nm激发波长，460nm发射波长的滤光片的荧光显微镜观察细胞。

注意事项

 I. DAPI对人体有一定刺激性，为了您的健康和安全，实验时请穿实验服并戴手套。

II. 荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。

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