2×Taq PCR Master Mix (with dye)
产品信息
产品货号 | 产品名称 | 规格 | 价格(元) |
DY10201 | 2×Taq PCR Master Mix(with Dye) | 5×1 mL | 168 |
产品描述
本产品是即用型的常规PCR预混液,是将Taq DNA聚合酶、dNTP混合物、MgCl2以及优化的反应缓冲液配制成的2倍浓度的混合物,反应时只需加入引物和模板即可进行扩增,简化了操作过程,并减少了PCR操作过程中的污染。本产品中含有染料,染料的加入不影响PCR反应,PCR后,可直接进行电泳,节省时间。本产品可用于常规PCR鉴定、小片段目标基因克隆、平端PCR产物加A实验。
保存方式
-20 ℃保存,有效期2年。
产品特点
快捷:PCR反应所必需试剂集一管之中,数分钟即可完成反应体系配制
便利:PCR反应后可直接电泳(含染料)
高效:以λDNA为模板,扩增长度可达8 kb,可高效扩增≤4 kb片段(图例1)
灵敏:可从0.05 ng人基因组DNA 模板中扩增出特定基因片段(图例2)
稳定:可经受反复冻融。4℃放置30天,室温放置1周后,扩增性能不受影响
常用反应体系(50μL)
组分 | 用量 |
2×Taq PCR Master Mix (with dye) | 25 μL |
上游引物 | 0.2-1.0 μM(终浓度) |
下游引物 | 0.2-1.0 μM(终浓度) |
模板DNA | 1-50 ng(质粒);10 ng-1 μg(基因组) |
灭菌ddH2O | 至 50 μL |
备注:Mg2+终浓度为2mM
扩增程序
扩增片段<3K 扩增片段≥3K(推荐引物长度≥30bp)
94℃ | 1分钟30秒 | 94℃ | 5分钟 | ||||
30次循环: | { | 94℃ | 20秒 | 30次循环: | { | 94℃ | 5秒 |
50-60℃ | 20秒 | 68℃ | 60秒/Kb | ||||
72℃ | 60秒/Kb | 72℃ | 5分钟 | ||||
72℃ | 5分钟 | 4℃ | 保温 | ||||
4℃ | 保温 |
使用建议
1.使用本试剂扩增得到的PCR产物 3´ 端有一突出"A"碱基,可直接克隆于T载体中;
2.需要融解混匀后使用,防止离子浓度不均匀;
3.应根据实验目的选择合适的循环数,循环数过少,会造成扩增量不足;循环数过多,扩增量增加,但突变率也会增加,并造成非特异性扩增;
4.根据引物Tm值设置合适退火温度,退火温度过低,会造成非特性扩增;过高可能扩增失败。
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